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teknova培養基在最佳化過程中的設計步驟

2022-06-14      73
  培養基是指人工模擬細胞在體內生長的營養環境✘◕│,供給微生物▩☁☁▩、植物或動物(或組織)生長繁殖的✘◕│,由不同營養物質組合配製而成的營養基質✘◕│,是提供細胞營養和促進細胞生長增殖的物質基礎☁◕。一般都含有碳水化合物▩☁☁▩、含氮物質▩☁☁▩、無機鹽(包括微量元素)▩☁☁▩、維生素和水等幾大類物質☁◕。
  teknova培養基的澄清度應以便於輕鬆的觀察到渾濁為宜▩☁☁▩、濃度應當遵循供應商建議的濃度▩☁☁▩、若無菌生產過程中使用了過濾器✘◕│,能夠透過生產過程同一級別的過濾器過濾為準✘◕│,如需稀釋過濾✘◕│,培養基濃度應提供微生物生長能力驗證;同時培養基料液應能滿足全部覆蓋生產裝置☁◕。影響該培養基滅菌效果的因素除滅菌溫度和時間外✘◕│,還有培養基的成分和物理狀態▩☁☁▩、PH▩☁☁▩、微生物數量▩☁☁▩、微生物細胞含水量▩☁☁▩、微生物細胞菌齡和耐熱性▩☁☁▩、蒸汽中空氣的排除情況▩☁☁▩、攪拌和泡沫等☁◕。
  teknova培養基的最佳化過程中✘◕│,實驗設計分為3個步驟◕·₪◕:
  1.篩選✘◕│,基於現有商業培養基進行篩選✘◕│,以確定重要組分的群組以及初步最佳化✘◕│,如使用簡單的▩☁☁▩、以實驗為依據的單次單因子方法解決複雜的最佳化☁◕。
  2.最佳化✘◕│,基於DOE對已確定的重要組分進行進一步最佳化✘◕│,主要最佳化基礎培養基▩☁☁▩、補料培養基▩☁☁▩、一些新增物等✘◕│,如使用響應曲面法找出多變數體系中的*條件☁◕。
  3.驗證✘◕│,對最終的培養基進行放大驗證✘◕│,分別用最佳化好的培養基與現用的或商業無血清的培養基培養細胞✘◕│,比較各自的生長指標與抗體表達水平☁◕。
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